Efecto del uso de dos técnicas de selección espermática en la producción in vitro de embriones de alpaca

Abstract

El objetivo del presente trabajo de investigación fue evaluar el efecto del uso de dos técnicas de selección espermática en la producción in vitro de embriones de alpaca. Los ovarios y testículo fueron colectados del matadero local, y trasladados a 37°C en solución salina (0.9%) suplementado con gentamicina. Los ovocitos de calidad I, II y II fueron incubados en medio de maduración por 32 h a 38.5 °C y 5% O2 y 5% CO2. Para la fecundación in vitro, los espermatozoides del epidídimo fueron seleccionados mediante la técnica de gradiente de Percoll y Swim up. 18h después de incubados los ovocitos con los espermatozoides, estos fueron denudados de las células del cumulus y cultivados en medio de cultivo SOFaa durante 7 días. Se evalúa la tasa de mórulas y blastocistos y su calidad morfológica al día 7 de cultivo. De un total de 370 ovarios se recuperaron 1137 ovocitos, haciendo un promedio de 3,6 ovocitos/ovario. Luego del proceso de maduración y fecundación y cultivo de in vitro, la tasa de blastocistos fue de 8,43 ± 6,04% y 3,89 ± 1,75%, para ovocitos fecundados con espermatozoides seleccionados con gradiente de Percoll y Swim up, respectivamente, no encontrándose diferencias estadísticas significativas (p>0.05), entre los grupos. En conclusión, la fecundación in vitro de ovocitos de alpaca con espermatozoides seleccionadas con dos técnicas de selección (percoll y swim up) no influyen significativamente en la cantidad y calidad de mórulas y blastocistos al día 7 de cultivo embrionario.

The objective of this research was to evaluate the effect of the use of two sperm selection techniques for in vitro production of alpaca embryos. The ovaries and testis were collected from the local slaughterhouse and transport to 37 ° C in saline solution (0.9%) supplemented with gentamicin. Quality I, II and II oocytes were incubated in a maturation medium for 32 h at 38.5 ° C and 5% O2 and 5% CO2. For in vitro fertilization, sperm from the epididymis were selected using the Percoll gradient and Swim up technique. 18h after the oocytes were incubated with the sperm, these were denuded from the cumulus cells and cultured in SOFaa culture medium for 7 days. Morula and blastocyst rate and their morphological quality are evaluated at day 7 of culture. From a total of 370 ovaries, 1,137 oocytes were recovered, making an average of 3.6 oocytes / ovary. After the maturation and fertilization process and in vitro culture, the blastocyst rate was 8.43 ± 6.04% and 3.89 ± 1.75%, for oocytes fertilized with sperm selected with Percoll gradient and Swim up, respectively, not finding significant statistical differences (p> 0.05), between the groups. In conclusion, the in vitro fertilization of alpaca oocytes with spermatozoa selected with two selection techniques (percoll and swim up) did not significantly influence the quantity and quality of morulae and blastocysts at day 7 of embryo culture.