Comparison of extenders with the addition of egg yolk for cooling alpaca sperm obtained from deferent ducts

Abstract

The use of non-commercial and commercial extenders for cooling alpaca sperm has already been reported, the latter showing certain advantages over the first. The Andromed® (AM) extender was created for use in ruminants and has also been tested in ejaculated and epididymal alpaca sperm. According to the manufacturer, this extender does not need the addition of egg yolk (EY); however, it is known that the addition of EY to some extenders improves the preservation of cooled sperm. The objective of this study therefore was to compare a non-commercial extender (Tris) with the addition of EY vs. the commercial extender AM with and without the addition of EY, for cooling alpaca sperm obtained from diverted deferent ducts. Fifteen pools of deferent duct sperm were formed using samples from two or three different males for each. Each sperm pool was evaluated and then divided into three aliquots that were diluted to a final concentration of 30 × 106 sperm ml-1 (0 h) with either: (1) Tris with 20% EY (T-EY), (2) AM, or (3) AM with 20% EY (AM-EY). Samples were cooled to 5◦C and the following sperm parameters were evaluated after 24 and 48 h of storage: motility, viability, membrane function, acrosome integrity, morphology, and chromatin condensation. Motility was also evaluated after 72 h of storage. The samples that best preserved progressive and total sperm motility at the 24 and 48 h evaluation periods were the ones diluted with AM-EY, observing that with this extender these motility patterns decreased significantly after 72 h of storage compared to time 0 h (p < 0.05). A significant decrease (p < 0.05) in total and progressive motility was observed at 48 h for the T-EY and AM extender compared to 0 h. AM was the only extender in which the percentages of viable sperm decreased significantly (p < 0.05) after 48 h of conservation. For the rest of sperm parameters evaluated, no significant differences were observed between any of the extenders at any evaluation time. The Andromed® extender with the addition of 20% EY could be an alternative option for cooling alpaca sperm obtained from deferent ducts.

Ya se ha informado del uso de diluyentes comerciales y no comerciales para enfriar el esperma de alpaca, mostrando el segundo ciertas ventajas sobre el primero. El diluyente Andromed® (AM) fue creado para su uso en rumiantes y también ha sido probado en esperma eyaculado y epididimario de alpaca. Según el fabricante, este diluyente no necesita la adición de yema de huevo (YE); sin embargo, se sabe que la adición de YE a algunos diluyentes mejora la conservación del esperma refrigerado. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue comparar un diluyente no comercial (Tris) con la adición de EY vs. el diluyente comercial AM con y sin la adición de EY, para el enfriamiento de esperma de alpaca obtenido de conductos deferentes desviados. Se formaron quince pools de esperma de conducto deferente utilizando muestras de dos o tres machos diferentes para cada uno. Cada pool de esperma fue evaluado y luego dividido en tres alícuotas que fueron diluidas a una concentración final de 30 × 106 espermatozoides ml-1 (0 h) con: (1) Tris con 20% de EY (T-EY), (2) AM, o (3) AM con 20% de EY (AM-EY). Las muestras se enfriaron a 5◦C y tras 24 y 48 h de almacenamiento se evaluaron los siguientes parámetros espermáticos: motilidad, viabilidad, función de la membrana, integridad del acrosoma, morfología y condensación de la cromatina. También se evaluó la motilidad tras 72 h de almacenamiento. Las muestras que mejor conservaron la motilidad espermática progresiva y total en los periodos de evaluación de 24 y 48 h fueron las diluidas con AM-EY, observándose que con este diluyente estos patrones de motilidad disminuyeron significativamente tras 72 h de almacenamiento en comparación con el tiempo 0 h (p < 0,05). Se observó una disminución significativa (p < 0,05) de la motilidad total y progresiva a las 48 h para el diluyente T-EY y AM respecto al tiempo 0 h. AM fue el único diluyente en el que los porcentajes de espermatozoides viables disminuyeron significativamente (p < 0,05) tras 48 h de conservación. Para el resto de parámetros espermáticos evaluados, no se observaron diferencias significativas entre ninguno de los diluyentes en ninguno de los tiempos de evaluación. El diluyente Andromed® con la adición de 20% de EY podría ser una opción alternativa para el enfriamiento de espermatozoides de alpaca obtenidos de conductos deferentes.